在神經(jīng)科學(xué)研究中，“實時觀察活體小動物腦內(nèi)功能動態(tài)” 是解析腦機(jī)制、研發(fā)神經(jīng)疾病藥物的核心需求。然而，小鼠等小動物的顱骨（厚度 1-2mm）如同 “天然屏障”，傳統(tǒng)成像技術(shù)要么難以穿透（如熒光成像）、要么分辨率不足（如 MRI）、要么有輻射風(fēng)險（如 CT），無法兼顧 “穿透顱骨、高分辨率、功能量化、長期追蹤” 四大關(guān)鍵需求。小動物活體光聲腦功能成像技術(shù)基于光聲效應(yīng)的獨特優(yōu)勢，突破顱骨物理屏障，實現(xiàn)對腦內(nèi)血流、血氧、神經(jīng)活動的無創(chuàng)、實時、高分辨率監(jiān)測，為神經(jīng)科學(xué)研究帶來革命性突破。
一、傳統(tǒng)腦成像技術(shù)的 “顱骨困境”：神經(jīng)研究的四大瓶頸
小動物腦研究需覆蓋 “宏觀腦區(qū)結(jié)構(gòu) - 微觀血管網(wǎng)絡(luò) - 動態(tài)功能變化” 的全尺度觀察，而傳統(tǒng)技術(shù)在顱骨穿透與功能解析上均存在難以逾越的局限：
1.穿透深度與分辨率的矛盾：熒光成像（如共聚焦、雙光子）雖分辨率可達(dá) 1-2μm，但近可見光易被顱骨與腦組織散射吸收，穿透深度不足 1mm，僅能觀察顱骨表面或去顱骨后的淺層皮層，無法觸及海馬體、丘腦等皮層下關(guān)鍵腦區(qū)；
2.功能信息與成像速度的權(quán)衡：MRI 無輻射且能穿透顱骨，但其空間分辨率僅 100-200μm，難以捕捉毛細(xì)血管級別的血流變化，且單幅腦功能成像需 5-10 分鐘，無法實時追蹤腦內(nèi)快速動態(tài)過程（如神經(jīng)活動引發(fā)的血流波動）；
3.輻射風(fēng)險與長期追蹤的沖突：CT 雖能穿透顱骨并提供結(jié)構(gòu)信息，但電離輻射會損傷小鼠腦組織，無法進(jìn)行長期動態(tài)監(jiān)測（如連續(xù) 4 周觀察阿爾茨海默病小鼠的腦內(nèi)變化），且無法量化腦功能參數(shù)；
4.侵入性操作的局限：傳統(tǒng)腦功能研究常需通過 “顱骨開窗” 或 “頭部固定” 等侵入性操作，破壞小鼠腦內(nèi)微環(huán)境穩(wěn)態(tài)，導(dǎo)致實驗結(jié)果與真實生理狀態(tài)存在偏差 —— 例如顱骨開窗會改變腦內(nèi)壓力與血流，影響神經(jīng)活動記錄的準(zhǔn)確性。
這些瓶頸使傳統(tǒng)技術(shù)難以回答 “腦缺血時皮層下區(qū)域血流如何變化”“學(xué)習(xí)記憶過程中海馬體血氧動態(tài)” 等關(guān)鍵科學(xué)問題，嚴(yán)重制約神經(jīng)科學(xué)發(fā)展。
二、光聲腦功能成像的技術(shù)突破：穿透顱骨的核心邏輯
小動物活體光聲腦功能成像以 “光聲效應(yīng)” 為核心，通過三大技術(shù)設(shè)計突破顱骨屏障，實現(xiàn)腦功能的精準(zhǔn)監(jiān)測：
1.近紅外光的顱骨穿透優(yōu)勢：系統(tǒng)采用 700-1100nm 的近紅外脈沖激光（處于生物組織 “光學(xué)窗口”），該波段光在顱骨與腦組織中的散射、吸收損耗極低 —— 小鼠顱骨對近紅外光的透過率達(dá) 60%-80%，遠(yuǎn)高于可見光（透過率 < 10%）。激光穿透顱骨后，被腦內(nèi)血紅蛋白（主要吸收體）、神經(jīng)元特異性探針等物質(zhì)吸收，引發(fā)局部組織瞬時熱膨脹，產(chǎn)生微弱超聲信號（光聲信號）；
2.高靈敏度超聲探測與信號重建：搭載高數(shù)值孔徑（NA 1.4）的超聲探測器，可捕捉穿透顱骨后的微弱光聲信號，信號采集頻率達(dá) 10MHz 以上；結(jié)合三維重建算法，將超聲信號轉(zhuǎn)化為腦內(nèi)三維圖像，空間分辨率達(dá) 5-10μm，既能清晰顯示毛細(xì)血管網(wǎng)絡(luò)（直徑 5-10μm），又能覆蓋皮層下 5mm 深度（含海馬體、紋狀體等腦區(qū)），解決傳統(tǒng)技術(shù) “穿透深則分辨率低” 的矛盾；
3.功能量化與動態(tài)追蹤能力：通過分析光聲信號的強(qiáng)度、頻率變化，可實現(xiàn)兩大核心功能量化：①腦血流灌注監(jiān)測：基于血紅蛋白光聲信號的動態(tài)變化，計算腦內(nèi)不同區(qū)域的血流速度、血管密度，分辨率達(dá)毛細(xì)血管級別；②血氧飽和度（sO?）分析：利用氧合血紅蛋白與去氧血紅蛋白在不同波長下的吸收差異，量化腦內(nèi)局部 sO?，反映神經(jīng)活動的代謝需求（神經(jīng)激活時局部血流與 sO?會快速升高）；同時，無輻射特性支持對同一小鼠進(jìn)行長達(dá)數(shù)月的動態(tài)追蹤，避免侵入性操作對腦環(huán)境的破壞。
三、應(yīng)用場景：重塑神經(jīng)科學(xué)研究范式
（一）腦卒中研究：早期缺血區(qū)的 “精準(zhǔn)定位”
傳統(tǒng) MRI 需 30 分鐘以上才能檢測到腦缺血區(qū)，而光聲腦功能成像可實現(xiàn) “超早期監(jiān)測”：
1.在小鼠大腦中動脈阻塞（MCAO）腦卒中模型中，系統(tǒng)在阻塞后 30 分鐘內(nèi)，即可通過光聲信號變化識別出缺血區(qū)（去氧血紅蛋白信號升高、血流速度下降 50% 以上）；
2.清晰顯示缺血區(qū)的毛細(xì)血管閉塞情況，分辨率達(dá) 10μm，比 MRI（100μm）更精準(zhǔn)定位缺血核心區(qū)與半暗帶；
3.動態(tài)追蹤溶栓藥物治療效果：給藥后 1 小時，可實時觀察到半暗帶區(qū)域血流逐漸恢復(fù)（氧合血紅蛋白信號升高），為腦卒中早期干預(yù)機(jī)制研究提供 “可視化證據(jù)”。某實驗室數(shù)據(jù)顯示，光聲成像檢測的缺血區(qū)范圍與病理切片結(jié)果相關(guān)性達(dá) 0.94，遠(yuǎn)超 MRI（0.82）。
（二）神經(jīng)退行性疾?。耗X功能衰退的 “動態(tài)追蹤”
在阿爾茨海默?。ˋD）小鼠模型研究中，光聲成像解決了 “長期監(jiān)測腦內(nèi)功能變化” 的難題：
1.連續(xù) 4 周追蹤 AD 小鼠海馬體區(qū)域：發(fā)現(xiàn)模型組小鼠海馬體血流灌注量每周下降 5%-8%，sO?降低 3%-5%，而對照組無明顯變化，且這一功能衰退早于 MRI 觀察到的海馬體萎縮（AD 模型中萎縮通常在 8 周后出現(xiàn)）；
2.結(jié)合 Aβ 斑塊特異性光聲探針，可同步觀察 Aβ 斑塊沉積（探針光聲信號）與局部血流變化 —— 發(fā)現(xiàn) Aβ 斑塊周圍 50μm 范圍內(nèi)，血流速度下降 30%，為 “斑塊沉積導(dǎo)致局部腦缺血” 的機(jī)制提供直接證據(jù)；
3.評估抗 AD 藥物效果：給藥后 6 周，光聲成像顯示模型組海馬體血流與 sO?恢復(fù)至對照組的 80%，證明藥物可改善腦內(nèi)微循環(huán)，為藥物研發(fā)提供量化指標(biāo)。
（三）腦功能連接：神經(jīng)活動的 “實時映射”
在小鼠學(xué)習(xí)記憶實驗中，光聲成像實現(xiàn)對多腦區(qū)功能連接的動態(tài)觀察：
1.小鼠進(jìn)行水迷宮訓(xùn)練時，系統(tǒng)實時監(jiān)測皮層、海馬體、紋狀體的血流與 sO?變化 —— 發(fā)現(xiàn)訓(xùn)練成功時，海馬體與皮層的血流同步升高（延遲 < 100ms），證明兩腦區(qū)間存在功能連接；
2.量化不同腦區(qū)的功能響應(yīng)強(qiáng)度：海馬體血流升高幅度達(dá) 25%，皮層達(dá) 18%，紋狀體達(dá) 12%，反映各腦區(qū)在學(xué)習(xí)記憶中的不同作用；
3.對比腦損傷小鼠：損傷海馬體后，訓(xùn)練時皮層與海馬體的血流同步性消失，學(xué)習(xí)能力顯著下降，為 “海馬體調(diào)控學(xué)習(xí)記憶” 的機(jī)制提供活體動態(tài)證據(jù)。
四、未來方向與革命價值
光聲腦功能成像的下一步發(fā)展將聚焦三大方向：①更高分辨率：通過超高頻超聲探測器（50MHz 以上），將空間分辨率提升至 2-3μm，實現(xiàn)單細(xì)胞級別的神經(jīng)活動監(jiān)測；②多模態(tài)融合：與熒光成像、光遺傳學(xué)結(jié)合，同步觀察 “神經(jīng)元激活 - 血流變化 - 分子表達(dá)” 的關(guān)聯(lián)；③大動物模型適配：開發(fā)適用于大鼠、猴等大動物的光聲系統(tǒng)，為臨床轉(zhuǎn)化研究提供橋梁。
這項技術(shù)的革命性價值，在于首次打破顱骨屏障，為神經(jīng)科學(xué)研究提供 “無創(chuàng)、實時、高分辨率、長期追蹤” 的腦功能觀察工具 —— 它無需破壞腦內(nèi)微環(huán)境，即可捕捉腦內(nèi)從毛細(xì)血管到腦區(qū)網(wǎng)絡(luò)的動態(tài)變化，讓科研者 “親眼看到” 活鼠腦內(nèi)的神經(jīng)活動與疾病進(jìn)展。正如顯微鏡推動細(xì)胞生物學(xué)革命，光聲腦功能成像正推動神經(jīng)科學(xué)進(jìn)入 “活體動態(tài)觀察” 的新時代。
